Стволовые клетки при болезни Крона: результаты I фазы испытаний
19.07.2005
2888
0
28880
Местная терапия кишечных свищей аутологичными мезенхимальными клетками у пациентов с рефрактерной болезнью Крона
Болезнь Крона (БК) - иммунопатологическое воспаление толстого и тонкого отделов кишечника, сопровождающееся хронической болью, диарреей и образованием язв. В результате хронического рецедивирующего течения, заболевание осложняется появлением перфораций, кишечных свищей и стенозов. Данные осложнения лечатся только паллиативными хирургическими методами. Очень часто после иссечения свищей возникают рецидивы в связи с низкой репаративной активностью в зоне хронического воспалительного процесса.
Опираясь на факт чётко установленного аутоиммунного патогенеза БК, были начаты клинические испытания метода аутологичной трансплантации гемопоэтических клеток для лечения рефрактерных форм [1,2]. Системное введение аутологичных гемопоэтических и аллогенных клеток костного мозга на фоне иммуносупрессии продемонстрировало безопасность и эффективность таких подходов [1-4]. В настоящее время испытания продолжаются.
Известно, что миграция или трансплантация прогениторных клеток костного мозга стимулирует процесс репаративной регенерации поврежденных тканей [5,6]. Гипотеза о том, что малодифференцированные клетки, изолированные из костного мозга или жировой ткани, введеные в зону хронического воспаления, могут индуцировать или стимулировать репаративные процессы, была положена в основу исследований по эффективности местной клеточной терапии БК. 2 года назад испанская группа Garcia-Olmo впервые сообщила об успешной трансплантации аутологичных клеток, выделенных из жировой ткани, для лечения ректовагинального свища у пациентки с БК [7]. В недавнем номере журнала Diseases of the Colon & Rectum опубликованы результаты I фазы клинических испытаний такого подхода для лечения рефрактерной БК, выполненной этой же группой исследователей.
В исследование было включено 10 пациентов, отобранные по следующим критериям: возраст старше 18 лет, наличие установленного диагноза БК более 5 лет, отсутствие лечебного эффекта на стандартную терапию, аллергические реакции на специфические препараты, индекс БК более 250, наличие кишечных свищей в качестве осложнения основного заболевания.
У пациентов забирали липоаспират в объеме 100 мл. Из полученного материала в культуре выделяли клетки, называемые авторами "мезенхимальными стволовыми" (МСК), экспрессирующие c-Kit (CD117), CD90 и виментин на 2-3 пассажах.
Ход свища кюретировали обычным способом или с применением эндоскопической техники, после чего клетки вводили в стенку свища или в слизистую и подслизистую прямой кишки (в зависимости от локализации свища) в общем количестве 3-30 миллионов. Для дополнительной герметичности свищевой ход обрабатывали фибриновым клеем и ушивали. Пациенты выписывались под амбулаторное наблюдение на 3-е сутки. Общее время наблюдения составляло 7-22 месяцев.
У 6 пациентов из 8 произошло полное закрытие свищевых ходов без рецидива в указанные сроки наблюдения. У 2-х пациентов наружное отверстие свища закрылось не полностью. В отдаленном послеоперационном периоде выполняли биопсию из мест трансплантации. В результате гистологического и цитологического исследования данных, указывающих на наличие неоплазии, выявлено не было.
Основываясь на полученных данных, авторы считают метод клеточной трансплантации МСК жировой ткани для лечения кишечных свищей у пациентов с БК безопасным и эффективным. Не было получено никаких неблагоприятных реакций на введение трансплантационного материала. Не было выявлено зависимости эффекта от количества введённых клеток. Группа приступает ко II фазе клинических испытаний.
В этом исследовании была оценена лишь безопасность метода. Говорить о клинической эффективности можно будет только при рандомизации и сравнении с контрольной группой. В работе также не приводятся данные по динамике индекса активности БК после трансплантации. Данные, указывающие на безопасность местной трансплантации МСК, полученные авторами, очень важны, поскольку в эксперименте было показано, что клетки костного мозга, мигрирующие в очаг хронического воспаления желудочно-кишечного тракта, могут стать причиной возникновения аденокарциномы [8]. Катамнестические данные и морфологические исследования биоптатов отрицают образования опухолей у пациентов через год после проведения процедуры.
Остаётся абсолютно неясным механизм действия пересаженных клеток. Авторы опирались на исследования, демонстрирующие эффективность трансплантации мышечной ткани в закрытии свищей, вызванных БК [9] и возможность дифференцировки МСК подкожного жира в миоциты [10]. Однако, чтобы показать дифференцировку пересаженных клеток, нужно их пометить in vitro и выполнить ряд иммуногистохимических исследований биопсийного материала. В дискуссии статьи авторы указывают, что морфологически биоптаты (n=2) представляли собой обыкновенную рубцовую ткань. Поэтому, скорее всего, введённые клетки стали источником фибробластов и сформировали рубец. Однако МСК могли стимулировать и резидентные клетки (слизистой и подслизистой) к ускоренной репарации и формированию рубца.
На все неясные вопросы может ответить более тщательно подготовленная II фаза испытаний метода. Однако уже сейчас можно говорить о перспективности этого простого метода, который может стать альтернативой прочим методам лечения осложнений рефрактерной болезни Крона и значительно улучшить качество жизни пациентов.
Литература:
1. Burt RK, et al. High-dose immune suppression and autologous hematopoietic stem cell transplantation in refractory Crohn disease. Blood 2003; 101; 5: 2064-2066
2. Oyama Y, Craig RM, Traynor AE, at all. Autologous hematopoietic stem cell transplantation in patients with refractory Crohn's disease. Gastroenterol 2005; 128: 552-563
3. Lopez-Cubero SO, Sullivan KM, McDonald GB. Course of Crohn’s disease after allogeneic marrow transplantation. Gastroenterology 1998;114: 433-440
4. Kreisel W, et al. Complete remission of Crohn's disease after high-dose cyclophosphamide and autologous stem cell transplantation. Bone Marrow Transplant 2003; 32; 3: 337-340
5. Hess D, et al. Bone marrow-derived stem cells initiate pancreatic regeneration. Nat Biotechbol 2003; 21; 7: 763-770
6. Yannaki E, Athanasiou E, Xagorari A, et al. G-CSF-primed hematopoietic stem cells or G-CSF per se accelerate recovery and improve survival after liver injury, predominantly by promoting endogenous repair programs. Exp Hematol 2005; 33: 108-119
7. Garcia-Olmo D, Garcia-Arranz M, Garcia LG, et al. Autologous stem cell transplantation for treatment of rectovaginal fistula in perianal Crohn's disease: a new cell-based therapy. Int J Colorectal Dis 2003; 18: 451-454
8. Houghton J-M, Stoicov C, Sachiyo Nomura, et al. Gastric cancer originating from bone marrow-derived cells. Science 2004; 306: 1568-1571
9. Rius, J, Nessim, A, Nogueras, JJ, Wexner, SD. Gracilis transposition in complicated perianal fistula and unhealed perineal wounds in Crohn's disease. Eur J Surg 2000; 166: 218-222
10. Mizuno H, Zuk PA, Zhu M, et al. Myogenic differentiation by human processed lipoaspirate cells. Plast Reconstr Surg 2002; 109: 199-209
Волков А.В., http://celltranspl.ru по материалам Dis Colon Rectum 2005; 48: 1416-1423
Болезнь Крона (БК) - иммунопатологическое воспаление толстого и тонкого отделов кишечника, сопровождающееся хронической болью, диарреей и образованием язв. В результате хронического рецедивирующего течения, заболевание осложняется появлением перфораций, кишечных свищей и стенозов. Данные осложнения лечатся только паллиативными хирургическими методами. Очень часто после иссечения свищей возникают рецидивы в связи с низкой репаративной активностью в зоне хронического воспалительного процесса.
Опираясь на факт чётко установленного аутоиммунного патогенеза БК, были начаты клинические испытания метода аутологичной трансплантации гемопоэтических клеток для лечения рефрактерных форм [1,2]. Системное введение аутологичных гемопоэтических и аллогенных клеток костного мозга на фоне иммуносупрессии продемонстрировало безопасность и эффективность таких подходов [1-4]. В настоящее время испытания продолжаются.
Известно, что миграция или трансплантация прогениторных клеток костного мозга стимулирует процесс репаративной регенерации поврежденных тканей [5,6]. Гипотеза о том, что малодифференцированные клетки, изолированные из костного мозга или жировой ткани, введеные в зону хронического воспаления, могут индуцировать или стимулировать репаративные процессы, была положена в основу исследований по эффективности местной клеточной терапии БК. 2 года назад испанская группа Garcia-Olmo впервые сообщила об успешной трансплантации аутологичных клеток, выделенных из жировой ткани, для лечения ректовагинального свища у пациентки с БК [7]. В недавнем номере журнала Diseases of the Colon & Rectum опубликованы результаты I фазы клинических испытаний такого подхода для лечения рефрактерной БК, выполненной этой же группой исследователей.
В исследование было включено 10 пациентов, отобранные по следующим критериям: возраст старше 18 лет, наличие установленного диагноза БК более 5 лет, отсутствие лечебного эффекта на стандартную терапию, аллергические реакции на специфические препараты, индекс БК более 250, наличие кишечных свищей в качестве осложнения основного заболевания.
У пациентов забирали липоаспират в объеме 100 мл. Из полученного материала в культуре выделяли клетки, называемые авторами "мезенхимальными стволовыми" (МСК), экспрессирующие c-Kit (CD117), CD90 и виментин на 2-3 пассажах.
Ход свища кюретировали обычным способом или с применением эндоскопической техники, после чего клетки вводили в стенку свища или в слизистую и подслизистую прямой кишки (в зависимости от локализации свища) в общем количестве 3-30 миллионов. Для дополнительной герметичности свищевой ход обрабатывали фибриновым клеем и ушивали. Пациенты выписывались под амбулаторное наблюдение на 3-е сутки. Общее время наблюдения составляло 7-22 месяцев.
У 6 пациентов из 8 произошло полное закрытие свищевых ходов без рецидива в указанные сроки наблюдения. У 2-х пациентов наружное отверстие свища закрылось не полностью. В отдаленном послеоперационном периоде выполняли биопсию из мест трансплантации. В результате гистологического и цитологического исследования данных, указывающих на наличие неоплазии, выявлено не было.
Основываясь на полученных данных, авторы считают метод клеточной трансплантации МСК жировой ткани для лечения кишечных свищей у пациентов с БК безопасным и эффективным. Не было получено никаких неблагоприятных реакций на введение трансплантационного материала. Не было выявлено зависимости эффекта от количества введённых клеток. Группа приступает ко II фазе клинических испытаний.
В этом исследовании была оценена лишь безопасность метода. Говорить о клинической эффективности можно будет только при рандомизации и сравнении с контрольной группой. В работе также не приводятся данные по динамике индекса активности БК после трансплантации. Данные, указывающие на безопасность местной трансплантации МСК, полученные авторами, очень важны, поскольку в эксперименте было показано, что клетки костного мозга, мигрирующие в очаг хронического воспаления желудочно-кишечного тракта, могут стать причиной возникновения аденокарциномы [8]. Катамнестические данные и морфологические исследования биоптатов отрицают образования опухолей у пациентов через год после проведения процедуры.
Остаётся абсолютно неясным механизм действия пересаженных клеток. Авторы опирались на исследования, демонстрирующие эффективность трансплантации мышечной ткани в закрытии свищей, вызванных БК [9] и возможность дифференцировки МСК подкожного жира в миоциты [10]. Однако, чтобы показать дифференцировку пересаженных клеток, нужно их пометить in vitro и выполнить ряд иммуногистохимических исследований биопсийного материала. В дискуссии статьи авторы указывают, что морфологически биоптаты (n=2) представляли собой обыкновенную рубцовую ткань. Поэтому, скорее всего, введённые клетки стали источником фибробластов и сформировали рубец. Однако МСК могли стимулировать и резидентные клетки (слизистой и подслизистой) к ускоренной репарации и формированию рубца.
На все неясные вопросы может ответить более тщательно подготовленная II фаза испытаний метода. Однако уже сейчас можно говорить о перспективности этого простого метода, который может стать альтернативой прочим методам лечения осложнений рефрактерной болезни Крона и значительно улучшить качество жизни пациентов.
Литература:
1. Burt RK, et al. High-dose immune suppression and autologous hematopoietic stem cell transplantation in refractory Crohn disease. Blood 2003; 101; 5: 2064-2066
2. Oyama Y, Craig RM, Traynor AE, at all. Autologous hematopoietic stem cell transplantation in patients with refractory Crohn's disease. Gastroenterol 2005; 128: 552-563
3. Lopez-Cubero SO, Sullivan KM, McDonald GB. Course of Crohn’s disease after allogeneic marrow transplantation. Gastroenterology 1998;114: 433-440
4. Kreisel W, et al. Complete remission of Crohn's disease after high-dose cyclophosphamide and autologous stem cell transplantation. Bone Marrow Transplant 2003; 32; 3: 337-340
5. Hess D, et al. Bone marrow-derived stem cells initiate pancreatic regeneration. Nat Biotechbol 2003; 21; 7: 763-770
6. Yannaki E, Athanasiou E, Xagorari A, et al. G-CSF-primed hematopoietic stem cells or G-CSF per se accelerate recovery and improve survival after liver injury, predominantly by promoting endogenous repair programs. Exp Hematol 2005; 33: 108-119
7. Garcia-Olmo D, Garcia-Arranz M, Garcia LG, et al. Autologous stem cell transplantation for treatment of rectovaginal fistula in perianal Crohn's disease: a new cell-based therapy. Int J Colorectal Dis 2003; 18: 451-454
8. Houghton J-M, Stoicov C, Sachiyo Nomura, et al. Gastric cancer originating from bone marrow-derived cells. Science 2004; 306: 1568-1571
9. Rius, J, Nessim, A, Nogueras, JJ, Wexner, SD. Gracilis transposition in complicated perianal fistula and unhealed perineal wounds in Crohn's disease. Eur J Surg 2000; 166: 218-222
10. Mizuno H, Zuk PA, Zhu M, et al. Myogenic differentiation by human processed lipoaspirate cells. Plast Reconstr Surg 2002; 109: 199-209
Волков А.В., http://celltranspl.ru по материалам Dis Colon Rectum 2005; 48: 1416-1423
Ваш комментарий:
Только зарегистрированные пользователи могут оставлять комментарии. Чтобы оставить комментарий, необходимо авторизоваться.
Последние комментарии
