Трансгенные куры у нас пока не получаются

Получать лекарственные вещества из яиц трансгенной птицы планируют специалисты Всероссийского государственного НИИ животноводства РАСХН под руководством академика РАСХН Л.К.Эрнста. Впрочем, пока в распоряжении ученых нет ни трансгенных яиц, ни курицы, способной их откладывать, ни даже петуха, который мог бы стать отцом такой курицы.

Коровы, овцы и козы давно привлекают внимание генных инженеров. Биологически активные белки человека, которые традиционно выделяли из донорской крови (гормоны, факторы свертывания и т.п.) во многих случаях гораздо эффективнее и безопаснее получать с молоком трансгенных животных. Ведь донорская кровь опасна для здоровья, а микроорганизмы не могут синтезировать функциональный человеческий белок. За рубежом есть трансгенные козы, которые продуцируют чужеродные белки в чрезвычайно высоких концентрациях (до 4 г/л).

В России таких животных нет. Попытки сотрудников Всероссийского государственного НИИ животноводства РАСХН получить животных-продуцентов успехом не увенчались. И тогда ученые обратили внимание на кур. Куры начинают нести яйца в возрасте шести месяцев. Вместе с яйцом трансгенная курица отложит и необходимые белки, останется только их выделить. Содержать птиц гораздо дешевле, чем стадо животных. Производство 1 г трансгенного белка из молочной железы трансгенного животного обходится за рубежом в 100 долларов, а такое же количество "яичного" белка будет стоить всего 10-25 центов.

Однако эти планы, столь заманчивые на бумаге, трудно реализовать. В куриное яйцо практически невозможно ввести ДНК; большое количество желтка и плотная цитоплазма не позволяют подобраться к ядру. Поэтому российские специалисты решили использовать вирусный вектор: вставить в него нужные гены и ввести в яйцо, а уж до клеточного ядра он сам доберется. Вектор изготовили на основе вируса лейкемии Молони и вставили в него последовательности гена эритропоэтина человека под контролем промотора (то есть области, регулирующей работу гена) одного из генов казеина крупного рогатого скота или последовательность гена гормона роста человека под контролем промотора вируса саркомы Рауса. Почему ученые решили, что регуляторные области вирусных и коровьих генов будут хорошо работать в птичьем геноме и обеспечат эффективный синтез трансгенных белков, они не объяснили. Судя по всему, вектор "слепили, из того, что было", то есть осталось от работ по трансгенезу овец и коз.

Генные конструкции вводили в зародышевый диск куриных яиц, прежде чем уложить их в инкубатор. Яйцо прокалывали в тупом конце длинной толстой иглой шприца и вводили ее на глубину 2 см. Яйца очень плохо переносят такую процедуру. Если в контрольной группе из 40 яиц вылупилось 32 цыпленка, то в опытных группах - всего по 4-8 цыплят. К сожалению, чужую ДНК содержали как раз эмбрионы, погибшие в процессе инкубации. Среди вылупившихся цыплят только один имел в крови следы присутствия векторной ДНК. Это был цыпленок, почему-то получивший номер 3976. Он дожил до шести месяцев и превратился в петушка, после чего ученые убедились, что в сперме № 3976 векторной ДНК нет, поэтому потомкам он ничего передать не сможет и ценности для племенного дела не представляет. Петушка забили и обнаружили следы нужной ДНК в печени, сердце и кишечнике, то есть тех органах, куда введенная в яйцо ДНК могла попасть из кровеносной системы зародыша и просто "прилипнуть" к тканям, не встраиваясь в геном. Строго говоря, проведенные пробы не позволяют утверждать, что петушок действительно был трансгенным. Исследователи даже не пытались искать следы чужого белка или каким-либо другим способом проверить, работает ли введенный ими ген на новом месте. Тем не менее, экспериментаторы довольны результатом, считают, что получили трансгенную птицу и намерены совершенствовать методику.

Дополнительная информация:
пос. Дубровицы Моск. обл., Всероссийский государственный НИИ животноводства РАСХН, Волкова Н.А.,
факс: (27) 65-11-01; natavolkova@ inbx.ru

Интернет-журнал "Коммерческая биотехнология" http://www.cbio.ru/ по материалам агентства "Информнаука"