Получение нервных клеток для клинического использования
Работа, проведенная под руководством профессора Алексея Терских (Alexei Terskikh), завершилась созданием эффективного протокола дифференцировки, который легко воспроизводим и не приводит к появлению в клетках мутаций. При трансплантации полученных нервных стволовых клеток мышам эти клетки давали начало функциональным нейронам, которые интегрировались в состав коры полушарий большого мозга и обонятельных луковиц. Трансплантированные клетки ни в одном случае не приводили к развитию опухолей.
Стопроцентная дифференцировка популяции ЭСК в нейральные стволовые клетки – это первый шаг в разработке подходов к клеточной терапии нейродегенеративных расстройств. Отметим, что все существовавшие до сегодняшнего дня методы получения из ЭСК специализированных клеток не обеспечивали стопроцентной дифференцировки, в результате чего в популяции оставались ЭСК, при трансплантации способные дать начало тератомам – доброкачественным и злокачественным опухолям, состоящим из массы различных дифференцированных клеток.
Профессор Терских отметил, что большое количество пересевов клеточной культуры, которого требует большинство протоколов, приводит к снижению пластичности клеток, а также к мутациям и канцерогенезу. Данный протокол не требует большого числа пересевов культуры.
ЭСК культивировали в суспензии. В таком состоянии они образуют так называемые эмбриоидные тельца – маленькие шарообразные кластеры клеток, в которых ЭСК обычно претерпевают спонтанную разнонаправленную дифференцировку. После воздействия на клетки индукторов нейрональной дифференцировки, авторы культивировали их на пластике, а затем проверили присутствие в них маркерных белков стволовых клеток нервной ткани. Все клетки экспрессировали на своих мембранах данные белки. Анализ их генома также подтвердил, что 100% популяции является стволовыми клетками нервной ткани.
Результаты исследования были опубликованы 13 марта 2009 года в журнале Cell Death and Differentiation.
По материалам:
Burnham Institute