: Синтетические полимеры для остеогенной дифференцировки мезенхимальных стволовых клеток in vitro
В культуральную среду, содержащую дексаметазон (dexamethasone), аскорбиновую кислоту и бета-глицеролфосфат (DAG), для усиления остеогенной дифференцировки вводили также D,D,L,L-полилактид (ПЛЛА), коллаген I/III и полигалактин-910/полидиоксанон (ПГПД). После 28 дней культивирования in vitro клетки, прикрепленные к полимерам, смывались под воздействием папаина и соляной кислоты. Прохождение ионов кальция через биомембрану определялось фотометрически с использованием о-крезолфталеина.
При определении количества клеток, прикрепленных к полимерам, наибольшая адгезия наблюдалась к коллагену, несколько меньшая – к ПЛЛА, а к ПГПД прикреплялось меньше всего клеток, причем в начале процесса адгезия была более значима, чем по прошествии 28 дней.
В присутствии добавки DAG в культуральной среде клеточная пролиферация была наиболее значима для полимера ПЛЛА, несколько ниже – для ПГПД, а в отношении коллагена наблюдалось даже ингибирование процесса пролиферации. Все биополимеры способствовали аккумуляции ионов кальция в клетках. Более того, коллаген I/III и ПЛЛА обладали остеоиндуктивными свойствами в среде без добавок DAG.
Иммуноцитохимические исследования в отношении маркеров, характерных для остеобластов (остеопонтин и щелочная фосфатаза), клеток гематопоэтического ряда (CD34, CD45) и хондроцитов (коллаген II), подтвердили направление клеточной дифференцировки в описываемых условиях только в сторону образования остеобластов, несмотря на значительные различия для каждого из испытанных биополимеров в культуре мезенхемальных стволовых клеток.
Таким образом, использование биополимеров для пролиферации и остеогенной дифференцировки мезенхимальных стволовых клеток in vitro представляется перспективным направлением клеточной биотехнологии, но требует более детального изучения для получения более достоверных и надежных результатов.
Более детально со статьей M.Jager et al. «Proliferation and Osteogenic Differentiation of Mesenchymal Stem Cells Cultured onto Three Different Polymers In Vitro» можно ознакомиться в октябрьском выпуске Annals of Biomedical Engineering (V.33, #10, P.1319-1332, 2005).
Интернет-журнал «Коммерческая биотехнология» http://www.cbio.ru/ по материалам [url=http://springerlink.metapress.com/(3inz1245jm0zz545udkkdw55) ]Annals of Biomedical Engineering[/url]